สิ่งที่ต้องพิจารณาเมื่อเลือกกล้องจุลทรรศน์ที่เหมาะสมสำหรับระบบถ่ายภาพเซลล์สด

หากต้องการทำการทดลองถ่ายภาพเซลล์มีชีวิตให้ประสบความสำเร็จ การใช้วิธีการที่ถูกต้องถือเป็นสิ่งสำคัญ เมื่อเลือกกล้องจุลทรรศน์ที่เหมาะสมสำหรับการถ่ายภาพเซลล์มีชีวิต ควรพิจารณาประเด็นต่อไปนี้: ความสามารถในการดำรงอยู่ของตัวอย่าง ความเร็วในการรับภาพ (ความละเอียดตามเวลา) และความละเอียดที่ต้องการในทั้งสามมิติ

During live cell imaging, certain environmental conditions must be maintained to avoid detrimental physiological changes. In order to capture physiologically relevant cellular dynamics, live cell experiments require specific environmental conditions, including temperature, pH (via CO2), and humidity control. Furthermore, some experiments may even require hypoxic conditions. Modern incubation systems not only tightly control environmental conditions, they can also provide detailed data reports and alert users to temperature, gas, or humidity variations during the course of an imaging experiment. To minimize or avoid the effects of photodamage, getting the right balance between sensitive detection, accurate label separation (if using >1) และปริมาณแสงที่ต่ำที่สุดสำหรับการกระตุ้นถือเป็นสิ่งสำคัญ

สำหรับการทดลองเซลล์ที่มีชีวิต การรับข้อมูลด้วยความเร็วสูงมักมีความสำคัญ โดยเฉพาะอย่างยิ่งสำหรับการศึกษาเกี่ยวกับกระบวนการไดนามิกที่รวดเร็ว เช่น การสังเกตถุง การใช้ฟิลเตอร์ออปติกทำให้เกิดข้อจำกัดด้านความเร็วเนื่องจากจำเป็นต้องถ่ายภาพแบบต่อเนื่องเมื่อเปลี่ยนชุดฟิลเตอร์สำหรับแต่ละสี ซึ่งใช้ในการศึกษาปฏิสัมพันธ์ของส่วนประกอบหลายชิ้น การรวบรวมภาพแบบต่อเนื่องต้องใช้เวลามากกว่าการรวบรวมภาพพร้อมกัน และส่งผลให้การเคลื่อนตัวของตัวอย่างอย่างรวดเร็วอาจพลาดไปในระหว่างการรับข้อมูล เนื่องจากแต่ละสีมีช่วงเวลาระหว่างภาพหนึ่งไปยังภาพถัดไปนานกว่า นอกจากนี้ เมื่อการเปรียบเทียบโดยตรงระหว่างสองสีหรือมากกว่านั้นมีความสำคัญ สัญญาณอาจเคลื่อนที่ระหว่างการรับข้อมูลฟลูออเรสเซนต์แต่ละสีด้วยซ้ำ ทำให้การตีความข้อมูลมีความซับซ้อน

มีเทคโนโลยีมากมายให้เลือกใช้สำหรับการถ่ายภาพสามมิติในช่วงเวลาหนึ่ง การเลือกใช้ระบบจะขึ้นอยู่กับการทดลองของคุณ และว่าความเร็วที่สูงขึ้นหรือการส่องสว่างตัวอย่างที่น้อยลงระหว่างการถ่ายภาพนั้นมีความสำคัญต่อคุณหรือไม่เมื่อต้องการความละเอียดสามมิติที่ต้องการ การเลือกระบบที่เหมาะสมที่สุดนั้นโดยทั่วไปแล้ว คุณจะต้องเลือกระหว่างระบบถ่ายภาพเซลล์มีชีวิตแบบใช้กล้องหรือแบบคอนโฟคัล อย่างไรก็ตาม โซลูชันสมัยใหม่สามารถให้ทั้งสองรูปแบบได้ในลักษณะที่บูรณาการกัน